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葡萄金黄化植原体16SrDNA检测与RFLP分析

乾义柯;张祥林;马春春;王翀   

  1. 新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052
  • 收稿日期:2010-05-25 修回日期:2010-05-25 出版日期:2010-05-25 发布日期:2010-05-25

Detection and RFLP Analysis of 16S Ribosomal DNA of Phytoplasma Flavescence dorée

QIAN Yi-ke;ZHANG Xiang-lin;MA Chun-chun;WANG Chong   

  • Received:2010-05-25 Revised:2010-05-25 Online:2010-05-25 Published:2010-05-25

摘要: [目的]对多种植原体16SrDNA基因序列进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析比较,以期区分葡萄金黄化植原体不同亚种,从而为葡萄金黄化植原体的鉴定提供新依据.[方法]用植原体通用引物R16mF2/R16mR1扩增7种不同植原体16SrDNA基因序列,得到约1.5 kb的DNA片段,将此片段克隆到PGM-T载体,并通过酶切鉴定,对重组阳性克隆进行核酸序列测定及同源性分析,利用限制性内切酶XmnⅠ、XspⅠ、TaqⅠ和Rsa Ⅰ对目的片段进行酶切电泳分析.[结果]所扩增2个不同亚种的葡萄金黄化植原体D型和C型序列同源性最高,达99.72;,但利用限制性内切酶可以将上述2个亚种从植原体榆树黄化组中区分.[结论]利用限制性内切酶分析通用引物R16mF2/R16mR1所扩增的基因片段,可以将葡萄金黄化植原体区分.


ISSN 1001-4330 CN 65-1097/S
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