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Xinjiang Agricultural Sciences

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Establishment and Application of Real-time PCR for GRA6 Gene Detection of Toxoplasmosis

PENG Wu-li;JI Xin-cheng;SHI Qian;YU Xue-hui   

  • Received:2014-01-25 Revised:2014-01-25 Online:2014-01-25 Published:2014-01-25

实时荧光定量PCR检测弓形虫GRA6基因方法的建立和应用

彭武丽;季新成;史茜;于学辉   

  1. 石河子大学生命科学学院,新疆石河子832000;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐830063;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063





摘要： [目的]在建立快速且准确检测牛弓形虫病的实时荧光定量PCR方法,以进一步研究该病对奶牛的感染情况,为临床诊断与防控提供依据.[方法]以已发表的牛弓形虫GRA6基因作为检测弓形虫病的目的基因,对上述基因各设计一对引物和一条Taqman探针,该探针5端用荧光基团JOE标记,3端用Eclipse标记,进行单重荧光定量PCR.[结果]经反应条件的优化,建立了能够检测牛弓形虫GRA6基因的荧光定量PCR方法.该方法具有具有较好的特异性和可重复性,对GRA6基因的检测最低限为7×100copies/反应,是普通单重PCR的灵敏度的100倍.[结论]用该方法对58份临床样品进行检测,有12份样品存在弓形虫感染,阳性检出率为20.69;,可用来对弓形虫进行快速、准确的检测.