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Expression Vector Construction and genetic Transformation of Antifreeze SiPEBP gene in Rice

ZHANG Yan-hong;WANG Feng-bin;YUAN Jie;ZHAO zhi-qiang;Buhaliqiemu Abulizi;WEN Xiao-rong   

  • Received:2013-09-25 Revised:2013-09-25 Online:2013-09-25 Published:2013-09-25

抗寒SiPEBP基因表达载体构建及转化水稻的研究

张燕红;王奉斌;袁杰;赵志强;布哈丽且木·阿布力孜;文孝荣   

  1. 新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院温宿水稻试验站,新疆温宿843000;新疆农业科学院温宿水稻试验站,新疆温宿,843000

摘要: [目的]构建抗潮霉素标记基因的雪莲抗寒SiPEBP基因植物表达载体,转化新疆粳稻,为提高水稻的抗寒性奠定基础.[方法]用PCR方法扩增目的基因,连接到pMD19-T Vector载体上,测序验证,经BamHⅠ和SacⅠ双酶切,将目的片段连接到pMDC32表达载体上,通过冻融法将该载体导入根癌农杆菌EHA105中,通过根癌农杆菌介导法转化新疆粳稻品种秋田小町.[结果]得到抗寒基因SiPEBP,并构建成SiPEBP植物表达载体.获得了具有潮霉素抗性的水稻愈伤组织,经PCR技术鉴定,目的基因已整合到水稻基因组中.[结论]获得了转雪莲抗寒SiPEBP基因的水稻植株,这对深入研究该基因在水稻中的功能并探讨其在水稻耐冷分子育种中的应用价值奠定了基础.