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Transfection Efficiency of Three Transfection Reagents to PEF Cells and BHK Cells

ZHANG Wen-zhi;LI Ya;WANG Peng-yan;CHEN Chuang-fu   

  • Received:2013-04-25 Revised:2013-04-25 Online:2013-04-25 Published:2013-04-25

三种转染试剂对PEF细胞与BHK细胞转染效率的比较

张文智;李亚;王鹏雁;陈创夫   

  1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832000

摘要: [目的]比较三种转染试剂对原代细胞和传代细胞的转染效率,选择合适的转染试剂.[方法]以EGFP为报告基因,分别用脂质体、磷酸钙、罗氏试剂转染PEF细胞和BHK细胞.通过改变转染试剂和质粒DNA的剂量,利用流式细胞仪分析转染效率,从而确定最佳的转染试剂.[结果]对于PEF细胞,脂质体和磷酸钙转染效果不理想,细胞死亡率高,绿色荧光表达量少.罗氏转染试剂相对较好,细胞死亡率低,并且保持原有细胞形态.对于传代细胞BHK细胞而言,各转染试剂均可达到理想转染效果.[结论]不同的细胞对转染试剂的选择也不同,传代细胞BHK用脂质体即可达到理想的效果.利用罗氏试剂可以提高转染效率,但不明显.而对于原代细胞PEF,脂质体与磷酸钙试剂的转染效率很低.相比较而言,罗氏转染试剂效果更好些,细胞毒性小,转染率在10;~12;.