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Construction of Plant Expression Vector Carrying Sophora alopecuroides Lectin Gene and Its Transformation to Tobacco

WANG Yan;LI Ting-ting;LI Yang;WU Ting;WANG Meng-zhu;LIU Dong-liang;SUN Su-rong   

  • Received:2013-02-25 Revised:2013-02-25 Online:2013-02-25 Published:2013-02-25

苦豆子凝集素基因植物表达载体的构建及其对烟草的转化

王燕;李婷婷;李阳;吴婷;王梦竹;刘东亮;孙素荣   

  1. 新疆大学生命科学与技术学院/新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046

摘要: [目的]了解苦豆子凝集素基因(SAL)的功能,将该基因构建到植物表达载体并转化烟草,获得转基因植株.[方法]利用RT-PCR技术,提取苦豆子总RNA进行反转录得到cDNA,通过PCR扩增得到苦豆子凝集素基因SAL,并将其克隆到植物表达载体pCAMBIA1301上,产生重组质粒pCAMBIA1301-SAL.采用农杆菌介导法将重组质粒转化烟草,并进行分析鉴定.[结果]构建了植物表达载体pCAMBIA1301-SAL,转化烟草后经筛选获得76株转基因植株,经抗性筛选及PCR和RT-PCR鉴定,其中27株显示为阳性植株.[结论]苦豆子凝集素基因已经在烟草中成功表达,为进一步研究验证转基因烟草的抗病效果奠定了基础.