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Xinjiang Agricultural Sciences

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Construction and Transformation of Eukaryotic Express Vector of ZmCPK12 Gene from Maize

ZHANG Yu-lu;HAO Xiao-yan;Zumurumu;LIU Xiao-li;CHEN Guo;CHEN Xun-ji;HUANG Quan-sheng   

  • Received:2012-07-25 Revised:2012-07-25 Online:2012-07-25 Published:2012-07-25

玉米ZmCPK12基因真核表达载体的构建及转化

张毓露;郝晓燕;足木热木;刘小利;陈果;陈勋基;黄全生   

  1. 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091





摘要： [目的]CDPK是一类依赖于Ca2+而不依赖CaM及磷脂的蛋白激酶,或类钙调素结构域的蛋白激酶,是植物和低等动物所特有.研究为玉米CDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础.[方法]构建玉米ZmCPK12基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一.实验利用RT - PCR技术扩增得到大小为1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP -5N连接,获得重组真核表达质粒ZmCPK12 - 5N.[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmCPK12-5N构建成功.制备酵母感受态,将重组质粒电击转人酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功.[结论]成功构建了玉米mCPK12基因真核表达载体,并且成功转化了酵母.