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Xinjiang Agricultural Sciences

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Construction of Binary Vector Expressing dsRNA Resistant to ToMV and CMV

ZHANG Wei;LIU Wei-wei;QIN Rong;ZHANG Jian-yun;HUANG Jia-feng   

  • Received:2012-07-25 Revised:2012-07-25 Online:2012-07-25 Published:2012-07-25

dsRNA介导的抗ToMV和CMV植物表达载体的构建

张伟;刘炜炜;秦荣;张建云;黄家风   

  1. 石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室,新疆石河子,832003





摘要： [目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体.[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因；然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为676 bp的融合基因△MP-2b.再将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,并定向插入到植物表达载体pBIN438上35S启动子下游.[结果]构建了含两种不同病毒来源基因的植物表达载体pBIN438△MP-2b(i/r).酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致.[结论]为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础.