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Xinjiang Agricultural Sciences

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Optimization of SRAP - PCR Reaction System in Hami Melon

JI Juan;ZHANG Xue-jun;YI Hong-ping   

  • Received:2012-05-25 Revised:2012-05-25 Online:2012-05-25 Published:2012-05-25

新疆哈密瓜SRAP反应体系建立和优化

季娟;张学军;伊鸿平   

  1. 新疆农业科学院哈密瓜研究中心,乌鲁木齐830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐830052;新疆农业科学院哈密瓜研究中心,乌鲁木齐830091;海南省甜瓜西瓜遗传育种重点实验室,海南三亚572014





摘要： [目的]研究新疆哈密瓜SRAP反应的最佳体系,为进一步研究新疆哈密瓜分子标记辅助育种提供基础.[方法]采用均匀实验设计法对新疆哈密瓜SRAP - PCR反应体系的5个主要因子进行优化.[结果]优化后的SRAP - PCR反应体系扩增多态性高、带型清晰、稳定性好,是新疆哈密瓜SRAP扩增的最佳条件.利用该优化体系,对12个新疆哈密瓜地方品种基因组DNA进行SRAP扩增,大部分材料扩增出来的带清晰可辨、条带丰富、背景无干扰,满足分子标记应用的要求.[结论]20 μL的反应体系中各成分用量或浓度为:模板DNA 36 ng、Taq DNA聚合酶2.5U、dNTPs2.2 5 mmol/L、引物0.6μmol/L、Mg2+ 1.75 mmol/L和2μL10×PCR buffer.