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Xinjiang Agricultural Sciences

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Primary Culture and Identification of Renal Tubular Epithelial Cells of Xinjiang Fine -wool Sheep

PAN Qi;LI Hong-jian;PAN Xiao-liang;ZHANG Shu-xin;CUI Yan-xia;WANG Zhen-guo;XU Ya-nan   

  • Received:2012-02-25 Revised:2012-02-25 Online:2012-02-25 Published:2012-02-25

新疆军垦细毛羊肾小管上皮细胞的原代培养及鉴定

潘奇;李宏建;潘晓亮;张书信;崔艳霞;王振国;徐亚楠   

  1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832000;新疆兵团畜牧兽医总站,乌鲁木齐,830063





摘要： [目的]建立一种高效、实用的新疆军垦细毛羊肾小管上皮细胞原代培养方案,为肾脏损伤引起的疾病研究奠定基础.[方法]取5～8个月大的出栏细毛羊肾脏皮质,剪成1～2 mm3大小组块,分别采用传统组织块法和改良组织块法,在含15;～ 20;新生小牛血清的DMEM的培养基中进行原代培养,无需研磨或使用酶和化学试剂,根据上皮细胞自身的生长特性,首次结合刮除法,相差消化法和差速贴壁法,分离纯化上皮细胞,再选用0.037 mm孔径网筛过滤除去肾小球上皮细胞,分离纯化培养肾小管上皮细胞,细胞免疫组化进行鉴定.[结果]改良方法与传统方法相比,细胞贴壁早,生长快,处理时间短,减少了污染机率,提高了细胞培养效率,分离培养的肾小管上皮细胞,纯度达90;以上,细胞呈多角形,鹅卵石状,折光性强,连接紧密,可传至第9代,免疫细胞化学(CK - 18)染色鉴定为阳性.[结论]改良的组织块培养与传统的组织块培养以及常用的酶消化培养相比,经济、简单、不易污染,分离培养的肾小管上皮细胞,活性高,纯度高,是一种高效、实用的细毛羊肾小管上皮细胞培养方法.