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Xinjiang Agricultural Sciences

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Optimization of Prokaryotic Expression Conditions of N Protein Gene of Canine Distemper Virus (CDV)and Protein Purification

JIAN Zi-jian;MA Su-zhen;SHEN Wei-hong;ZHAI Shao-hua;ZHAO Sen   

  • Received:2012-02-25 Revised:2012-02-25 Online:2012-02-25 Published:2012-02-25

犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化

简子健;马素贞;申卫红;翟少华;赵森   

  1. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052





摘要： [目的]提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量.[方法]研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST - CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST - Sepharose 4B亲和层析柱对GST - CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定.[结果]大肠杆菌BL21 (DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600 =1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8h,GST - CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL.[结论]确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础.