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Xinjiang Agricultural Sciences

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Construction and Transformation of Eukaryotic Express Vector of HcPS_ H Gene from Halostachys caspica

HAO Xiao-yan;ZHANG Yu-lu;Zumu Remu;LIU Xiao-li;HUANG Quan-sheng   

  • Received:2012-12-25 Revised:2012-12-25 Online:2012-12-25 Published:2012-12-25

盐穗木HcPS_H基因真核表达载体的构建及转化

郝晓燕;张毓露;足木热木;刘小利;黄全生   

  1. 新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052





摘要： [目的]盐穗木(Halostachys caspica)属藜科盐生植物,是广泛分布于新疆干旱或半干旱荒漠盐碱环境中的一种极端耐盐的多年生稀盐多汁半灌木,对盐分适应性极强.PS_H基因是一个参与光合反应光系统的基因,在植物光合作用中起着重要的作用.构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体对于了解该基因在盐穗木耐盐过程中的作用有着重要意义.[方法]利用PCR技术扩增得到大小为441 bp的盐穗木HcPS_H基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒HcPS_H-5N.[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒HcPS_H-5N构建成功.制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功.[结论]成功构建盐穗木HcPS_H基因真核表达载体,并且能在真核细胞中正常表达.