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Optimization of Sperm Decondensation Treatments with Dithiothreitol in Situ Hybridization in Bulls

SUN Xian-ying;MENG Hao;LUO Kin-rong;SHEN Bo;GAO Qing-hua   

  • Received:2011-07-25 Revised:2011-07-25 Online:2011-07-25 Published:2011-07-25

牛精子原位杂交DTT去凝集条件优化

孙献莹;孟浩;骆新荣;沈波;高庆华   

  1. 塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔,843300;塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔843300;新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔843300;新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔,843300

摘要: [目的]确定牛精子原位杂交DTT去凝集处理的优化浓度及时同.[方法]牛精子解冻后经密度梯度离心优选并制片,采用0、5、10、20、40、80和100 mmol/L六个DTT浓度以及15、30、45和60 min4个时间段的28个组合进行去凝集处理,Motic Images Advanced 3.2软件测量精子解聚后头部面积.[结果]40 mmol/L DTT处理45min精子头部面积为(52.32±4.68 )μm2,浓度< 40 mmol/L的16个处理组及浓度≥40 mmol/L、处理时间<45 min的6个处理组,精子头部面积小于(52.32±4.68) μm2(p< 0.01);浓度>40 mmol/L、时间≥45 min的5个处理组,精子头部面积与40 mmol/L DTT 45 min组差异不显著(P>0.05),但精子形态不完整.[结论]40mmol/L DTT 45 min为较优处理组合.