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Xinjiang Agricultural Sciences

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Development and Application of RT-nested PCR for Detecting Canine Distemper Virus

YANG Jing-quan;HAN Meng-li;ZHU Yan-Ping;HUANG Xin;BO Xin-wen   

  • Received:2011-06-25 Revised:2011-06-25 Online:2011-06-25 Published:2011-06-25

犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

杨井泉;韩猛立;朱艳平;黄新;薄新文   

  1. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832003;新疆农垦科学院/新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000;新疆农垦科学院/新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000;新乡学院生命科学与技术系,河南,新乡,453003





摘要： [目的]建立一种犬瘟热病毒(CDV) RT-nested PCR检测方法.[方法]根据CDV弱毒株Onderstepoort 的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验.[结果]特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV),DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带.敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者.重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同.用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT- nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品.[结论]建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查.