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Xinjiang Agricultural Sciences

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Prokaryotic Expression of Hexon Gene of Infectious Canine Hepatitis Virus and Optimization of Expression

JIAN Zi-jian;MA Su-zhen;TAO Yu-cheng;ZHAI Shao-hua;ZHAO Sen   

  • Received:2011-05-25 Revised:2011-05-25 Online:2011-05-25 Published:2011-05-25

犬传染性肝炎病毒Hexon基因原核表达条件的优化与表达蛋白的活性

简子健;马素贞;陶玉成;翟少华;赵森   

  1. 新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052





摘要： [目的]为了提高犬传染性肝炎Hexon蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,研究Hexon基因蛋白的最佳表达条件和表达蛋白的活性.[方法]在大肠杆菌菌株BL21(DE3)培养过程中,选择诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IFTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件观察对Hexon融合蛋白表达的影响,以确定最佳表达条件,并用Westem-blot检测重组蛋白的生物活性.[结果]大肠杆菌BL21(DE3)在37℃培养2.25h后,添加终浓度为2.0 mmol/L的IPTG,27℃培养8 h,Hexon重组蛋白表达量最高(1.67mg/mL),所表达的重组蛋白能与犬传染性肝炎阳性血清相结合.[结论]在高浓度IPTG诱导和冷培养条件下,Hexon蛋白基因的表达量最高,表达出的重组蛋白具有很好的反应原性,为进一步研究六邻体蛋白的作用机理及亚单位疫苗的研究提供了实验基础.