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Establishment of Specific PCR Assay for Diagnosing Swine Toxoplasma gondii

ZHANG Yun-feng;LIU Fu-yuan;XU Xue-ping;WANG Guang-lei   

  • Received:2010-09-25 Revised:2010-09-25 Online:2010-09-25 Published:2010-09-25

猪弓形虫特异PCR诊断方法的建立

张云峰;刘福元;徐雪萍;王光雷   

  1. 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所,新疆石河子,832000;新疆畜牧科学院兽医研究所,乌鲁木齐,830000

摘要: [目的]建立特异PCR方法诊断猪弓形虫病.[方法]以核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列作为弓形虫种特异的遗传标记,优化PCR反应条件,对猪弓形虫分离株和临床病料进行检测.随机取阳性PCR扩增片段进行克隆,测序鉴定.[结果]在猪弓形虫分离株中PCR扩增出目的条带,且在肺门淋巴结和肠系膜淋巴结中扩增出特异性条带;PCR方法能检测到的最低DNA量为7.81 pg/μL;测序结果显示核苷酸序列与Genbank中已登录的猪弓形虫IST1基因序列相应部分序列完全相同.[结论]该PCR方法具有较高的敏感性和特异性,是诊断猪弓形虫病的一种快速检测方法.