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Xinjiang Agricultural Sciences

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Isolation of Protoplast Shuangya No.5 Flax from Apocynum venetum Linn Protoplast and Somatic Hybridization

JIANG Li;MIAO Shu-kui;JI Qiao-ling;ZHU Guo-li   

  • Received:2010-07-25 Revised:2010-07-25 Online:2010-07-25 Published:2010-07-25

双亚5号亚麻与罗布麻原生质体解离及体细胞杂交

姜丽;苗书魁;计巧灵;朱国丽   

  1. 新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046;新疆轻工职业技术学院食品工程系,乌鲁木齐,830021;新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046





摘要： [目的]探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础.[方法]以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养.[结果]制备亚麻和罗布麻原生质体的最佳渗透剂分别是5.6;蔗糖和0.7 mol/L甘露醇;游离亚麻和罗布麻原生质体的最适酶组合都是0.5; Cellulase Onozuka R-10+1.0; Cellulase Onozuka RS+0.2; Pectolyase Y-23;最佳酶解时间分别是4和3 h;亚麻细胞最佳继代时间是转瓶后的第3 d,在此条件下原生质体存活率均为92.0;,产量分别达到1.24×106和22.4×106个/mL;2种原生质体电融合的最佳参数依次为:AC 8 v/cm,持续25 s-DC 1 500 v/cm,脉冲宽度为60 μs,脉冲次数1次-交流电时间为9 s,重复次数2次.在此条件下融合率达到20.5;.[结论]亚麻与罗布麻原生质体在一定的条件下可实现体细胞杂交.