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Xinjiang Agricultural Sciences

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A Study on Construction of Tams1 Gene Eukaryotic Expression Vector in Xinjiang Bovine Theileria annulata and Immunological Reactivity

JIAN Zi-jian;MIAO Zhong-qiu;MA Su-zhen;GU Si-yi   

  • Received:2009-03-25 Revised:2009-03-25 Online:2009-03-25 Published:2009-03-25

牛环形泰勒虫新疆株Tams1基因真核表达载体的构建及免疫反应性研究

简子健;苗中秋;马素贞;谷思燚   

  1. 新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;辽宁农业职业技术学院,辽宁营口,115009





摘要： 研究采用PCR 方法从焦虫病患牛的全血基因组中扩增得到846 bp 的Tams1 基因片段,将其克隆至真核表达载pcDNA3.1(+),构建Tams1基因的真核表达质粒.经测序验证后, 将Tams1基因的真核表达质粒尾静脉注射小白鼠进行Tams1 基因的瞬时表达.取接种小鼠的肝脏提取总RNA,采用RT-PCR 扩增目的条带;用重组质粒pcDNA3.1(+)-Tams1 皮下注射免疫小白鼠4 次后,进行免疫抗体检测.试验结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1含有完整的Tmas1基因片段.用该重组质粒免疫小鼠56 d后,小鼠血清中抗重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1的抗体效价可达1∶12 000以上,说明该重组质粒具有很强的抗原性.经Western-blot检验可得到抗原-抗体复合物产生的特异性条带,说明该重组质粒pcDNA3.1(+)- Tams1具有免疫原性.