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Study on Optimization of ISSR-PCR Reaction System of Atractylodes macrocephala Koidz by Orthogonal Design

MA Hui;ZHANG Zhi-jun;LUO Shu-ping;HE Fu-ji   

  • Received:2009-01-25 Revised:2009-01-25 Online:2009-01-25 Published:2009-01-25

药用植物白术ISSR-PCR反应体系的正交优化研究

马辉;张智俊;罗淑萍;何福基   

  1. 浙江林学院/浙江省现代森林培育技术重点实验室,浙江临安,311300;阿克苏地区药品检验所,新疆阿克苏,843000;新疆农业大学,乌鲁木齐,830052;浙江林学院/浙江省现代森林培育技术重点实验室,浙江临安,311300;新疆农业大学,乌鲁木齐,830052

摘要: 采用正交试验设计的方法,对白术ISSR-PCR反应体系进行优化,确立了适合于白术的ISSR-PCR反应的最佳体系,即在25 μL反应体系中,10×buffer 2.5 μL,Mg2+3 mmol/L,Taq酶0.75U,模板200 ng,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.5 μmol/L,通过梯度PCR试验得到相应引物的最佳退火温度为55.0℃.