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Xinjiang Agricultural Sciences

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Cloning and expression CAMP gene of Streptococcus agalactiae from mastitis milk

WANG Xiang-liu;WANG Chang-fa;YANG Hong-jun;Ahemaiti·Maimaiti;GAO Yun-dong;ZHONG Ji-feng   

  • Received:2009-01-25 Revised:2009-01-25 Online:2009-01-25 Published:2009-01-25

牛源无乳链球菌CAMP因子(cfb)的克隆及原核表达

王向柳;王长法;杨宏军;阿合买提·买买提;高运东;仲跻峰   

  1. 山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052;山东省农业科学院奶牛研究中心,济南,250100;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐,830052





摘要： 提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中.测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比, 第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4;.成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7;.这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件.