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Study on the Cloning、Expression and Functional Identification of Thermophilic Neutral Protase Gene

MAO Jun;WANG Wei;ZHANG Zhi-dong;XIE Yu-qing;LUO Shu-ping   

  • Received:2008-05-25 Revised:2008-05-25 Online:2008-05-25 Published:2008-05-25

高温中性蛋白酶基因的克隆、表达及验证研究

茆军;王玮;张志东;谢玉清;罗淑萍   

  1. 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830091;新疆农科院微生物所,乌鲁木齐,830091;新疆农科院微生物所,乌鲁木齐,830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830091

摘要: 对地衣芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶基因进行了克隆、测序及表达研究.以高温中性蛋白酶产生菌地衣芽孢杆菌XJT9503基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得特异性片段.经测序分析,其具有一个942 bp的蛋白酶完整阅读框.通过表达载体构建,获得质粒pPL-tnp,并转化至蛋白酶缺失受体菌枯草芽孢杆菌AB97013,经表达验证其蛋白酶最适作用温度和pH与出发菌相符.证明研究获得了高温中性蛋白酶基因及表达质粒pPL-tnp,并正确表达.