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Xinjiang Agricultural Sciences

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The Construction of T-DNA Insertional Mutants in Melons

XU Rong-hua;JIANG Lu;NING Xue-fei;LI Guan   

  • Received:2016-06-25 Revised:2016-06-25 Online:2016-06-25 Published:2016-06-25

甜瓜T-DNA插入突变体的构建

许荣华;姜陆;宁雪飞;李冠   

  1. 新疆大学生命科学与技术学院,乌鲁木齐,830046

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摘要： [目的]构建激活标签载体并将其转入甜瓜中,获得甜瓜T-DNA插入突变体,为甜瓜功能基因组学的研究奠定基础.[方法]用PCR法扩增目的DNA片段,经EcoRI和SacI顺序酶切,将目的片段连接到pCAMBIA2301载体上,构建含4 ×35s Enhancer DNA片段的激活标签载体.以甜瓜品种‘伽师’为材料,利用农杆菌介导的转化体系转化甜瓜愈伤组织,获得甜瓜T-DNA插入突变体.[结果]获得4株T0代甜瓜转化幼苗,通过Kan筛选和PCR鉴定甜瓜转化幼苗的DNA中是否含有目的基因,证明其中3株甜瓜转化幼苗为转基因植株.[结论]获得了突变植株,为甜瓜重要性状基因发掘奠定基础.