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Isolation and Culture Research on Mouse Embryonic Fibroblasts

ZHUANG Shu-zhen;L(U) Fang;PAN Wei;ZHANG Fu-chun   

  • Received:2007-06-25 Revised:2007-06-25 Online:2007-06-25 Published:2007-06-25

小鼠胚胎成纤维细胞分离培养研究

庄淑珍;吕芳;潘巍;张富春   

  1. 新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室/新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁木齐,830046;乌鲁木齐市新市区疾病预防控中心,乌鲁木齐,830011

摘要: 为探索实验室影响小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)分离和培养的因素,取昆明白小鼠胚胎分离成纤维细胞,利用体外培养体系,对不同胎龄、不同血清浓度、不同胰蛋白酶浓度和作用时间对MEF分离及培养的影响进行研究,观察MEF的生长形态及其生物学特性.结果表明,在实验室条件下,12.5~14.5 d胎龄的小鼠胎儿MEF分离效果最好;最佳培养基为DMEM添加15;小牛血清;第3代细胞增殖最旺盛;室温条件下,0.125;胰蛋白酶消化MEF时间以8~10 min为宜.在培养ES细胞时,应选择第3~5代的MEF作为饲养层细胞.研究获得了可在实验室分离制备MEF的方法,为实验室进一步分离培养ES细胞奠定基础.