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Study on Rapid Detection Method of Mediterranean Fruit Fly by Real-Time PCR Assay

LI Jing;ZHANG Xiang-lin;LUO Ming;LI Ya-wei;WANG Chong;ZHANG Xiao-ju   

  • Received:2016-06-25 Revised:2016-06-25 Online:2016-06-25 Published:2016-06-25

实时荧光PCR法快速检测地中海实蝇的研究

李京;张祥林;罗明;李亚伟;王翀;张小菊   

  1. 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐830052;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐830063;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052

摘要: [目的]设计用于扩增地中海实蝇的特异性引物,建立快速、灵敏检测地中海实蝇的实时荧光PCR方法.[方法]采用实蝇科昆虫线粒体DNA COI基因的通用引物扩增地中海实蝇以及其它三种供试实蝇的DNA片段,经测序、比对分析,设计出扩增地中海实蝇的特异性引物,用SYBR Green实时荧光PCR方法验证该引物的特异性与灵敏度.[结果]设计的引物对DZH-F/DZH-R能特异性检测出地中海实蝇,扩增产物的溶解曲线峰值Tm为79.2.该对引物检测地中海实蝇的灵敏度为10-3 ng/μL.[结论]所建立的SYBRGreen实时荧光PCR方法检测地中海实蝇特异性强、灵敏度高.