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Xinjiang Agricultural Sciences

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Molecular Detecting Technology of Sugar Beet Downy Mildew Baswd on Mitochondrial DNA Gene cox2

LI Jing;ZHANG Xiang-lin;WANG Chong;LI Ya-wei;ZHANG Xiao-ju   

  • Received:2016-05-25 Revised:2016-05-25 Online:2016-05-25 Published:2016-05-25

基于线粒体DNA cox2基因的甜菜霜霉病的分子检测技术

李京;张祥林;王翀;李亚伟;张小菊   

  1. 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐830052;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐830063;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063

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摘要： [目的]建立甜菜霜霉病菌检测技术.[方法]利用等位基因特异性PCR(AS-PCR)的原理,依据线粒体DNA(mtDNA)基因cytochrome coxidase subunit Ⅱ(cox2),运用卵菌门通用引物(P-COX2F/P-COX2R)扩增甜菜霜霉病菌及6种对照霜霉病菌的目的片段,测序,比对,根据等位基因特异PCR(AS-PCR)原理设计测甜菜霜霉病菌的特异性引物,并对该引物的特异性、灵敏度加以验证;分析同源性,构建系统发育树.[结果]通用引物扩增的甜菜霜霉病菌以及其他霜霉病菌片段大小约为630 bp,经比对,该霜霉病菌与Peronospora schachtii同源性达99;,并设计出特异性引物BSP-F/BSP-R,特异性引物BSP-F/BSP-R可以检测到10-2ng/μL的模板浓度.[结论]建立的甜菜霜霉病菌快速检测技术,为口岸的进出境监测与检测提供了科学依据.