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Based on Recombinase Polymerase Amplification , the Method of Detection of Grapevine leafroll-associated virus 3

  • Received:2016-02-25 Revised:2016-02-25 Online:2016-02-25 Published:2016-02-25

基于重组酶聚合酶扩增技术(RPA)的葡萄卷叶伴随病毒3号检测方法

张娜;乾义柯;魏霜;胡白石;陆平;赛铁尔汗;刘中勇;张永江;张祥林   

  1. 伊犁师范学院,新疆伊宁,835000;伊犁出入境检验检疫局,新疆伊宁,835000;汕头出入境检验检疫局,广东汕头,515041;南京农业大学,南京,290000;中国检验检疫科学研究院植物检疫研究所,北京,100029;新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830052

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摘要： [目的]建立一种快速、灵敏的重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测葡萄卷叶伴随病毒3(Grapevine leaf-roll-associated virus3,GLRaV-3)方法.[方法]根据GLRaV-3已测序和已报道的HSP7O基因(Heat shock protein 70)保守序列,设计用于RPA检测的特异性引物,建立GLRaV-3的RPA检测方法,并对其特异性和灵敏度进行验证.[结果]建立RPA检测方法能够从GLRaV-3带毒株中检测到约380 bp的特异性条带,仅需在37℃下恒温反应40 min,无需特殊的仪器设备,经特异性评价特异性好,且该方法与普通PCR检测灵敏度基本一致.[结论]建立的RPA检测方法特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合GLRaV-3的快速检测方法.