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Construction of GhCOMT1 Gene Sense, Anti-sense and RNAi Expression Vectors and Transformation

LI Xiao-dong;LI Bo;NI Zhi-yong;ZANG Hua;FAN Ling   

  • Received:2013-06-25 Revised:2013-06-25 Online:2013-06-25 Published:2013-06-25

棉花GhCOMT1基因的正义、反义与RNAi干扰载体的构建及转化

李晓东;李波;倪志勇;张桦;范玲   

  1. 新疆农业大学农学院,乌鲁木齐830052;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐,830091;新疆农业大学农学院,乌鲁木齐,830052

摘要: [目的]咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid 0-methyltransferase,COMT)是苯丙烷代谢途径中的一个关键酶催化,通过转基因技术深入研究GhCOMT1基因在棉纤维发育和木质素代谢途径中的作用.[方法]采用由棉纤维组织特异性启动子E6驱动的GhCOMT1基因构建正义、反义表达载体GhCOMT1基因的植物表达载体和RNAi干扰载体并转化棉花.[结果]目的基因成功整合至表达质粒中并且获得转基因后代.[结论]构建了由棉纤维组织特异性启动子E6驱动的GhCOMT1基因正义、反义表达载体;同时克隆了GhCOMT1基因的一段450 bp高度保守的NBD区序列,构建了GhCOMT1基因的RNAi干扰载体,并将上述载体转入农杆菌菌株LBA4404并成功转化棉花.