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Xinjiang Agricultural Sciences

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A Method of Improved Southern Blot Hybrid

LI Jian-ping;ZHANG Yan-hong;WANG Dong-mei;HUANG Quan-sheng   

  • Received:2007-06-25 Revised:2007-06-25 Online:2007-06-25 Published:2007-06-25

一种改良的Southern印迹杂交方法

李建平;张燕红;王冬梅;黄全生   

  1. 新疆农科院核生所,乌鲁木齐,830091





摘要： 在综合前人方法的基础上,改良了一种简捷、灵敏、廉价、效果可靠的Southern印迹杂交方案,使用0.4mol/L NaOH溶液将琼脂糖凝胶上的DNA在变性的同时转移到尼龙膜上,紫外交联固定后用于杂交.预杂交液和杂交液选用Church缓冲系统,该缓冲系统中仅需10 g/L BSA作为封闭剂即可.整个洗膜过程可简化为一种溶液、2～3次洗涤.碱变性及转移后的尼龙膜,也可以用于地高辛(DIG)等非放射性检测系统,并可耐多轮杂交和洗膜.方法可适用于包括高等植物基因组在内的多种生物材料的DNA检测.