]*>","")" /> Study on the Method of Detecting the Didymella Bryoniae by Real-Time PCR
Xinjiang Agricultural Sciences

• Article • Previous Articles     Next Articles

Study on the Method of Detecting the Didymella Bryoniae by Real-Time PCR

WANG Chong;ZHANG Xiao-ju;ZHANG Xiang-lin;ZHANG wei;ZHANG yu;LI Ya-wei;SUN Yan-fei   

  • Received:2015-08-25 Revised:2015-08-25 Online:2015-08-25 Published:2015-08-25

实时荧光PCR检测瓜类蔓枯病菌的方法研究

王翀;张小菊;张祥林;张伟;张瑜;李亚伟;孙燕飞   

  1. 新疆出入境检验检疫局,乌鲁木齐,830063;石河子大学,新疆石河子,832000

PDF





摘要： [目的]建立瓜蔓枯病菌(Didy mella bryoniae)的实时荧光PCR方法,为瓜蔓枯病菌快速分子检测奠定基础.[方法]通过Genebank网上已公布序列,选取瓜蔓枯病菌beta-tubulin(tub2)基因作为目的基因,设计了特异性引物和Taq Man探针,并对该引物和探针的反应条件进行优化.[结果]采用研究所设计的引物和探针对瓜上的其他菌株及近似菌株进行检测,该引物和探针可高度灵敏地检测到瓜蔓枯病菌.采用实时荧光PCR方法,25μL体系中只要有8.9 pg的核酸量就可以被检测到,检测灵敏度达到356 fg/μL,比普通PCR灵敏度高10倍.[结论]采用研究所设计的引物和探针对田间采集的病株和未知样品的检测,验证了引物和Taq Man探针的特异性.