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Xinjiang Agricultural Sciences

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Optimization of an Electrotransfer Solution-L for Ovis Aries Fibroblasts

  • Received:2015-08-25 Revised:2015-08-25 Online:2015-08-25 Published:2015-08-25

电转液L对绵羊成纤维细胞电转染条件优化

李炜杰;杨娇;王聪慧;罗健;周平;黄威;姚建龙;何高明;皮文辉   

  1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832000;新疆生产建设兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆石河子,832000;新疆生产建设兵团第五师91团,新疆博乐,833307;伊宁县动物卫生监督所,新疆伊宁,835100

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摘要： [目的]采用实验室配制的电转液L,优化绵羊成纤维细胞的转染效率.[方法]利用Lonza 4D-Nucleofector设备,针对实验室配制的电转液L,将P max绿色荧光蛋白表达质粒导入绵羊成纤维细胞中,通过流式细胞仪测定和荧光显微镜观测细胞转染效率.[结果]通过测定细胞转染效率,得到较佳电转方案:L电转液100μL悬浮绵羊成纤维细胞,采用CZ-167电转程序,质粒浓度4 g,2×106个细胞,电击一次,电转后37℃放置10 min可获得理想的转染效率.