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Xinjiang Agricultural Sciences

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IL-1β Probes Labeled with Digoxgenin of Duolang Sheep in Xinjiang and Detection

ZENG Guo-hang;XU Hong-wei;PAN Yi-wei;JIA Shan-ling;CAO Yu-hua;LI Lian-rui   

  • Received:2015-03-25 Revised:2015-03-25 Online:2015-03-25 Published:2015-03-25

新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测

曾国航;徐宏伟;潘伊微;贾山岭;曹玉华;李莲瑞   

  1. 塔里木大学生命科学学院,新疆阿拉尔,843300;新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室,新疆阿拉尔 843300;塔里木大学动物科学学院,新疆阿拉尔843300

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摘要： [目的]IL-1β是一种多效的促炎因子,在细胞因子炎性反应中为重要介质,处于介导炎性反应的重要因子,在造血和免疫活性中都发挥重要的作用.该实验结果为进一步研究绵羊分子免疫学,从多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的筛选基因,寻找与IL-1β相关的新基因奠定基础.[方法]将构建好的多浪羊的pMD-18T-lL-1β质粒[1]进行PCR扩增,经过切胶回收,目的基因的浓缩后,采用罗氏地高辛标记和检测试剂金标记IL-1β基因,获得IL-1β地高辛探针,进行敏感性检测,在Hybond N+膜上显影,计算探针浓度.[结果]计算出标记后的探针浓度为17.1 g/mL.[结论]通过southern杂交可以得知,Hybond N+膜上有IL-1β基因的双链DNA,标准杂交液中为DIG标记的IL-1β基因单链DNA,通过避光显色,在Hybond N+膜有深紫色的杂交条带,证明探针的浓度达到标准浓度.