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Xinjiang Agricultural Sciences

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Extracting Free DNA in Sheep Peripheral Blood and SRY Detection

JIANG Li-bin;ZHANG Yun-sheng;YANG Hua;YANG Yong-lin;SHI Guo-qing;FENG Xun-yong;ZHU Fei-fei   

  • Received:2014-07-25 Revised:2014-07-25 Online:2014-07-25 Published:2014-07-25

绵羊外周血中游离DNA提取及SRY基因检测

蒋立斌;张云生;杨华;杨永林;石国庆;冯训勇;朱飞飞   

  1. 石河子大学动物科技学院,新疆石河子,832000;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点室验室,新疆石河子,832000;石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000;新疆兵团绵羊繁育生物技术重点室验室,新疆石河子832000;裕民县巴什拜羊繁育中心,新疆裕民,834800





摘要： [目的]外周血中游离的DNA主要是指存在于血浆/血清等循环系统里的一些小片段DNA,应用在一些疾病的诊断以及非创伤性产前诊断方面.研究三种方法从绵羊外周血浆/血清中分离提取游离DNA,建立高效的外周血游离DNA提取方法,并对SRY基因进行PCR扩增.[方法]利用加热法、酚氯仿法以及试剂盒法对500 μL血浆/血清中游离的DNA进行提取.根据游离DNA片段大小的特点分别设计扩增产物大小为168 bp的检测引物和178 bp的SRY基因引物进行普通PCR检测.[结果]利用加热法、酚氯仿法、试剂盒法都提取到了游离的DNA,PCR后通过琼脂糖凝胶电泳检测到了168 bp的目的片段.同时利用PCR扩增到了178 bp的SRY基因目的片段.[结论]不同的提取方法均可有效提取分离绵羊外周血血清和血浆中游离的DNA片段,能够用于SRY基因的检测.